非瘟疫苗**消息：

2019年8月6日，中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所(中國動物衛(wèi)生與流行病學中心哈爾濱分中心)的《基因缺失的減毒非洲豬瘟病毒及其作為疫苗的應用》專利申請公布。發(fā)明人為步志高、?陳偉業(yè)、趙東明、何希君、劉任強和柳金雄，專利申請日期為2019年4月26日。

發(fā)明內容概括：

1、針對非洲豬瘟疫苗缺乏和已知疫苗的**性不夠理想，尤其國內疫苗的空白，研發(fā)非洲豬瘟基因缺失減毒疫苗的制備方法，并成功獲得了兩株**、**的疫苗株。

2、采用基因工程手段，對中國流行的非洲豬瘟分離株進行毒力基因(CD2V和MGF360-505R)缺失，獲得了兩株缺失毒株( RASFV△360-eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP-mcherry)，經過免疫和攻毒保護效力等系統(tǒng)評價，將效價和**性均表現優(yōu)異。

3、提供一種基因缺失減毒非洲豬瘟病毒，其特征在于，將基因I型的非洲豬瘟病毒進行MGF360-505R基因缺失，或進行CD2V與MGF360-505R基因聯(lián)合缺失而得到的。更優(yōu)選的是MGF360-505R聯(lián)合缺失是指MGF360和505R兩種基因全部序列缺失，或者CD2V與MGF360-505R聯(lián)合基因缺失是指CD2V、MGF360、505R三種基因序列全部缺失。

4、所述基因I型的非洲豬瘟病毒是中國流行株Pig/CN/HLJ/2018，其全長序列已于 Genbank公開( Genbank:MK333180.1)。

5、優(yōu)選的MGF360-505R基因缺失病毒相對于原始毒株全長序列缺失了第27942-35500位核苷酸;所述CD2V與MGF360-505R基因聯(lián)合缺失病毒相對于原始毒株全長序列缺失了第27942-35500位和第73394-74476位核苷酸。更具體構建的MGF360-505R基因缺失病毒，和CD2V與MGF360-505R聯(lián)合缺失的基因缺失病毒，已于2019年4月11日進行專利程序保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號分別是 CCTCC NO:V201925和 CTCC NO:V201924。

6、還提供了包含本發(fā)明的減毒非洲豬瘟病毒的疫苗，本發(fā)明的疫苗在受試者中誘導針對隨后的非洲豬瘟病毒攻擊的保護性免疫應答。

7、疫苗可以包含不同基因型的多種減毒非洲豬瘟病毒。此類疫苗可以能夠誘導針對多種ASF病毒基因型的交叉保護性免疫應答。

8、還提供了包含一種或多種本發(fā)明的減非洲豬瘟病毒的藥物組合物。該藥物組合物可用于預防或治療非洲豬瘟。疫苗或藥物組合物可以包含一種或多種本發(fā)明的減毒非洲豬瘟病毒，進一步任選地包含一種或多種佐劑，賦形劑，載體和稀釋劑。佐劑可以任何合適的佐劑，化學類免疫佐劑如氫氧化鋁、弗氏佐劑、礦物油、司鹽等;微生物類免疫佐劑如分枝桿菌、BCC、脂多糖、胞壁酰二肽、胞肽、脂溶性蠟質D、短小棒狀桿菌;植物類免疫佐劑多為從植物或大真菌中提取的多糖類，如茯苓多糖、紅花多糖、中草藥類等。而生化類免疫佐劑如胸腺肽、轉移因子、白細胞介素等。優(yōu)選的佐劑可以是納米佐劑生物佐劑，白介素、干擾素等。

9、本發(fā)明的疫苗也可用于聯(lián)合疫苗，如與豬的其他疫苗聯(lián)合，但重點在減毒活疫苗上，尤其是病毒基因的整合，如雙價苗，三價苗等。聯(lián)合疫苗可以包含不同基因型的多種減毒非豬瘟病毒，如此可以誘導針對多種非豬瘟病毒基因型的交叉保護性免疫應答。

10、本發(fā)明的疫苗的施用可以采用方便的途徑，例如肌內注射，鼻內，口服，皮下，透皮和陰道等途徑。本發(fā)明的減毒疫苗優(yōu)選采用肌肉注射，合適的劑量為102.5-102.5TCID50，優(yōu)選劑量為103-103TCID50。疫苗可以在初免-加強方案后施用。例如，在**次接種后，受試者可以在一段時間(例如約7，14，21或28天)之后接受第二次加強施用。通常，加強施用的劑量相同或低于初免施用的劑量。此外，也可以進行第三次加強免疫，例如免疫后2-3個月、6個月或一年。

11、本發(fā)明獲得的基因缺失的減毒非洲豬瘟病毒具有下述優(yōu)勢。本發(fā)明構建的兩株基因缺失非洲豬瘟病毒( RASFV△360-eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry)在免疫豬后，即使105 TCID50劑量免疫組動物均無體溫升高等臨床癥狀，血液和臟器病毒分離均為陰性，存活率均為100%，表明其充分致弱，作為疫苗是非常**的，且均優(yōu)于國外基因II型ASFV的類似研究。國外采用我國流行株同源性極高的 Georgia株構建了MGF360-505R基因缺失病毒，在免疫豬后的血液病毒分離陽性率在60%以上;采用基因II型 Malawi Li1-20/1株構建的CD2V單基因缺失病毒，在免疫豬后血液病毒分離陽性率為100%、存活率僅為0%。其次，在**性方面，強毒攻擊后，本發(fā)明構建的 RASFV△360eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry免疫保護率均為100%，血液病毒分離陽性率分別小于35%和100%，但在第21-22天均轉為陰性，表明兩株病毒都具有**的免疫保護效力，也**優(yōu)于國外采用基因II型ASFV的類似研究。國外MGF360-505R缺失Georgial株病毒免疫豬在攻毒后的血液病毒分離陽性率為70%。(其中，本發(fā)明采用的103 TCID50免疫劑量小于國外的104HAD50，但攻毒后血液病毒分離陽性率僅為25%):雖然本發(fā)明構建的MGF360-505R和CD2V雙基因缺失病毒免疫豬在攻毒后血液病毒分離陽性率為100%，略差于MGF360-505R基因缺失的病毒，但顯著優(yōu)于CD2V單缺失的基因II型Malawi Li1-20/1株病毒(免疫后死亡率100%)且攻毒后21天血液病毒分離就轉為陰性。最后，本發(fā)明構建的兩株基因缺失病毒免疫后21天就能夠提供充分的強毒攻擊保護優(yōu)于國外的28天。因此，采用流行地區(qū)的分離株來構建非洲豬瘟基因缺失減毒疫苗是**策略，也是中國研制非洲豬瘟疫苗的關鍵。因此，本發(fā)明構建的基因缺失非洲豬瘟病毒( RASEV△360-eGFP和RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry)具有巨大的應用價值。

經實驗表明所述兩種毒株均能提供對非洲豬瘟中國流行強毒株的100%免疫保護，可作為**和**的防控中國非洲豬瘟疫情的疫苗，具有極大的社會價值。

從非瘟疫苗專利消息公布至今，朋友圈早已被刷屏。有的人對此歡欣鼓舞，有的人卻也存在不同程度的疑惑。

A：疫苗就相當于救命良藥。他們不在乎什么毒株不毒株，不在乎專利不專利。他們只想知道疫苗面世還需要多久，售價多少，畢竟晚一天，損失就多一點。

B：這個項目的成功不但加快了我國在非洲豬瘟道路上探索的進程，還拓寬了我國在豬病領域上的版圖。

C：對于一個尚未上市的疫苗來講，從研發(fā)到使用，它需要不斷的優(yōu)化，這可能會花費很長時間。即使疫苗成功上市，他們還需要面對使用疫苗過后的**局面。好用，對有錢有地的大企業(yè)當然是個好消息，但小散戶被擠壓的局面勢必會加重。不好用，那么非瘟這個疫病將變得更加復雜。